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極小種群野生植物  華蓋木組培繁殖技術(shù)規(guī)程

標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所、云南交投生態(tài)環(huán)境工程有限公司

標(biāo)準(zhǔn)歸口單位：云南省林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)

標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：DB53/T 1426-2025

標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布日期：2025年6月7日

標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施日期：2025年9月7日

標(biāo)準(zhǔn)制定背景

華蓋木（Manglietiastrum sinicum）為我國(guó)特有的木蘭科 (Magnoliaceae) 單種屬植物，是被子植物中最古老的物種之一，僅分布在我國(guó)滇東南地區(qū)，為受國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)的極小種群野生植物。華蓋木是研究古氣候變遷、木蘭科植物起源、演化和系統(tǒng)分類的重要物種，科學(xué)研究?jī)r(jià)值高。同時(shí)，華蓋木四季常綠，植株高大挺拔，樹冠宛若華蓋，亭亭玉立，花香濃郁，讓人心醉神迷，嫩葉朱紅如烈火，老葉翠綠有光澤，是應(yīng)用前景廣闊的園林景觀植物。此外，華蓋木的木材結(jié)構(gòu)細(xì)致，有綠絹般光澤，耐腐、抗蟲，是珍貴的用材樹種。

華蓋木自然狀態(tài)下結(jié)實(shí)率較低，僅為22±3%，假種皮含油量達(dá)44.94%，影響其種子萌發(fā)。此外，華蓋木的種子在野外環(huán)境中常遭受嚙齒動(dòng)物與鳥類的大量取食，其萌發(fā)率受到周圍環(huán)境因素的顯著影響；其野外種群也更新困難。中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)過10余年對(duì)華蓋木進(jìn)行繁育研究，成功突破了華蓋木組培繁殖技術(shù)壁壘并解決了華蓋木種群更新困難的問題，通過應(yīng)用此項(xiàng)技術(shù)可在短期內(nèi)快速擴(kuò)大華蓋木種群數(shù)量。

制定華蓋木組培繁殖技術(shù)規(guī)程，將為華蓋木的無性繁殖提供技術(shù)支持，為促進(jìn)其他木蘭科瀕危物種的人工擴(kuò)繁和保護(hù)提供技術(shù)參考，對(duì)推動(dòng)生物多樣性可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容主要結(jié)構(gòu)

（一）范圍

標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了極小種群野生植物華蓋木（Manglietiastrum sinicum）組織培養(yǎng)的基本要求、外植體采集與處理、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯苗與生根培養(yǎng)、煉苗移栽等技術(shù)要求。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于極小種群野生植物華蓋木組培繁殖。

（二）規(guī)范性引用文件

LY/T 1882-2010  林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

（三）術(shù)語和定義

極小種群野生植物。分布地域狹窄或呈間斷分布、種群和個(gè)體數(shù)量少、人為干擾嚴(yán)重和隨時(shí)有滅絕風(fēng)險(xiǎn)的野生植物。

組織培養(yǎng)。無菌條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞以及原生質(zhì)體培養(yǎng)在人工培養(yǎng)基和人工控制的環(huán)境中，使其再生新植株的過程和技術(shù)。

外植體。用于建立植物組織培養(yǎng)的離體植物器官、組織、細(xì)胞以及原生質(zhì)體。

誘導(dǎo)培養(yǎng)。將消毒后的外植體接種到特定培養(yǎng)基中，經(jīng)過一段時(shí)間的培養(yǎng)，使之長(zhǎng)出愈傷組織、頂芽、腋芽、叢芽等的過程。

增殖培養(yǎng)。離體芽苗、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞不斷倍增的培養(yǎng)過程。

生根培養(yǎng)。誘導(dǎo)無根離體芽苗產(chǎn)生根的培養(yǎng)過程。

瓶苗煉苗。將組培苗連培養(yǎng)容器一起移至室外接近自然環(huán)境中培養(yǎng)，提高苗木的木質(zhì)化程度，增強(qiáng)苗木對(duì)自然光照和溫差變化適應(yīng)能力的過程。

移栽。將培養(yǎng)容器中長(zhǎng)到適宜高度、具備合適根數(shù)與根長(zhǎng)的生根苗，取出種植到基質(zhì)中，使苗木逐漸適應(yīng)自然條件的過程。

（四）組織培養(yǎng)基本要求

培養(yǎng)基配制、消毒、接種操作、接種器械清洗與消毒、接種室及培養(yǎng)室管理執(zhí)行LY/T 1882標(biāo)準(zhǔn)，其中：外植體消毒及誘導(dǎo)、增殖、生根等環(huán)節(jié)涉及的轉(zhuǎn)接、切分均應(yīng)于超凈工作臺(tái)進(jìn)行。

培養(yǎng)室培養(yǎng)條件：溫度23—30℃,光照強(qiáng)度1300—1800Lux, 光照時(shí)間每天10小時(shí)。

（五）外植體采集與處理

外植體采集。2—4月、9—12月，從生長(zhǎng)旺盛、無病蟲害植株的當(dāng)年生枝條上采集帶芽莖段作為外植體，并記錄外植體母株、采集時(shí)間和地點(diǎn)等信息。

保存與運(yùn)輸。采集的外植體宜當(dāng)天消毒接種。若需長(zhǎng)途運(yùn)輸，控制在3天內(nèi)，75%酒精擦拭表面后，用干凈的紙巾包裹置于自封袋中，放置冰袋低溫冷藏運(yùn)輸。

外植體消毒。剪去外植體上葉片，保留葉柄0.3—0.5厘米，剪成1.5—2厘米帶芽的莖段，于1%的肥皂液中浸泡10分鐘后用流動(dòng)的自來水清洗干凈；用75%酒精消毒8—10秒，無菌水沖洗3次后，用0.1%氯化汞溶液消毒5—8分鐘，再用無菌水沖洗3—5次。

（六）誘導(dǎo)培養(yǎng)

誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方。MS 6-BA 0.5—3.0毫克/升 IAA 1.0毫克/升 蔗糖30克/升 瓊脂5克/升，pH5.8。

接種要求。將消毒外植體葉柄和莖段兩端切去0.2—0.5厘米，按照芽生長(zhǎng)方向朝上原則，豎直或者傾斜接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，每個(gè)培養(yǎng)瓶接1個(gè)芽或者莖段，誘導(dǎo)腋芽和頂芽生長(zhǎng)。

褐化控制。14天內(nèi)每天更換外植體在培養(yǎng)容器內(nèi)接種的位置或者轉(zhuǎn)接于新的培養(yǎng)基。

（七）增殖培養(yǎng)

增殖培養(yǎng)基配方。MS 6-BA 0.0—2.0毫克/升 IAA 0.1—1.0毫克/升 蔗糖30克/升 瓊脂5克/升，pH5.8。

接種要求。腋芽和頂芽生長(zhǎng)至2—3厘米時(shí)，將其切成帶1—2個(gè)節(jié)的莖段，接種于增殖培養(yǎng)基，增殖周期50—60天。

（八）壯苗與生根培養(yǎng)

壯苗與生根培養(yǎng)基配方。MS IBA 0.1—2.0毫克/升 IAA 0.1—2.0毫克/升 蔗糖30克/升 瓊脂5克/升，pH5.8。

壯苗與生根培養(yǎng)操作。增殖培養(yǎng)的莖段生長(zhǎng)至3—4厘米時(shí)，切下生長(zhǎng)健壯、形態(tài)正常、帶頂芽、長(zhǎng)2—3厘米的莖段進(jìn)行壯苗與生根培養(yǎng)。

（九）煉苗移栽

組培瓶苗質(zhì)量要求。植株生長(zhǎng)健壯、葉形葉色正常，具2—3片展開葉；株高3—5厘米；根數(shù)量多于2條，根長(zhǎng)1—2厘米。

閉瓶煉苗。將組培瓶苗移植于遮光率60%—70%、濕度＜50%的大棚內(nèi)，閉瓶煉苗7—10天，使組培苗適應(yīng)自然光照和晝夜溫差。

移栽。基質(zhì)按珍珠巖：腐殖土：生紅土=1：1：2體積比配制，用多菌靈800倍液噴施基質(zhì)并與土混拌均勻，pH5.8—6.8，覆蓋塑料膜密封消毒7天。準(zhǔn)備規(guī)格為6厘米×7厘米栽培容器，將煉苗后的瓶苗取出，洗凈根部培養(yǎng)基，及時(shí)栽入容器中，澆透定根水。移栽到大棚后30天內(nèi)，溫度20℃—30℃，遮光率75%—85%，空氣濕度70%—80%，基質(zhì)含水量40%—50%；移栽30天后，逐步增加光照強(qiáng)度，每7天噴施70%甲基托布津可濕性粉劑800倍液1次和全營(yíng)養(yǎng)素葉面肥500倍液1次，連續(xù)噴施4—5次。

出圃要求。移栽培育1年，生長(zhǎng)健壯，苗高≥20厘米，地徑≥0.2厘米。

標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施意義

該標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布實(shí)施，為華蓋木組培繁殖提供了技術(shù)規(guī)范，對(duì)促進(jìn)華蓋木種質(zhì)資源保存、種群恢復(fù)及利用，維護(hù)生物多樣性具有重要意義。

來源：云南省林業(yè)和草原局

作者：云南省林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)   中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所